लिक्विड मोबाईल फेजच्या वापरातील दहा सामान्य चुका!

मोबाईल टप्पा रक्ताच्या द्रव अवस्थेच्या समतुल्य आहे, आणि वापरादरम्यान लक्ष देण्यासारख्या विविध गोष्टी आहेत. त्यापैकी, काही "तोटे" आहेत ज्याकडे लक्ष दिले पाहिजे.

01. सेंद्रिय सॉल्व्हेंट जोडल्यानंतर मोबाईल टप्प्याचे pH मोजा

जर तुम्ही सेंद्रिय ऍडिटीव्हने pH मोजले, तर तुम्हाला मिळणारा pH सेंद्रिय सॉल्व्हेंट जोडण्यापूर्वीपेक्षा वेगळा असेल. तथापि, सर्वात महत्वाची गोष्ट म्हणजे सातत्य असणे. सेंद्रिय सॉल्व्हेंट जोडल्यानंतर तुम्ही नेहमी pH मोजत असल्यास, तुम्ही वापरत असलेल्या पद्धतीमध्ये तुमची पायरी सांगा याची खात्री करा जेणेकरून इतर त्याच पद्धतीचे अनुसरण करतील. ही पद्धत 100% अचूक नाही, परंतु किमान ती पद्धत सुसंगत ठेवेल. अचूक pH मूल्य मिळवण्यापेक्षा हे अधिक महत्त्वाचे असू शकते.

02. कोणताही बफर वापरला नाही

बफरचा उद्देश पीएच नियंत्रित करणे आणि बदलण्यापासून रोखणे हा आहे. इतर अनेक पद्धती मोबाइल टप्प्याचा pH बदलतात, ज्यामुळे धारणा वेळ, शिखर आकार आणि उच्च प्रतिसादात बदल होऊ शकतो.

फॉर्मिक ऍसिड, टीएफए इत्यादी बफर नाहीत

03. सामान्य pH श्रेणीमध्ये बफर न वापरणे

प्रत्येक बफरमध्ये 2 pH युनिट श्रेणी रुंदी असते, ज्यामध्ये ते सर्वोत्तम pH स्थिरता प्रदान करते. या विंडोच्या बाहेरील बफर pH बदलांना प्रभावी प्रतिकार प्रदान करणार नाहीत. एकतर योग्य श्रेणीतील बफर वापरा किंवा तुम्हाला आवश्यक असलेली pH श्रेणी कव्हर करणारा बफर निवडा.

04. सेंद्रिय द्रावणात बफर जोडा

सेंद्रिय टप्प्यात बफर द्रावण मिसळल्याने बहुधा बफरचा अवक्षेप होऊ शकतो. बऱ्याच प्रकरणांमध्ये, पर्जन्यवृष्टी झाली असली तरीही, ते शोधणे कठीण आहे. नेहमी जलीय अवस्थेत सेंद्रिय द्रावण जोडण्याचे लक्षात ठेवा, जे बफर पर्जन्यवृष्टीची शक्यता मोठ्या प्रमाणात कमी करू शकते.

05. एका पंपाने 0% पासून एकाग्रता ग्रेडियंट मिसळा

आज उपलब्ध असलेले पंप मोबाइल फेज आणि डेगास इनलाइन प्रभावीपणे मिसळू शकतात, परंतु तुमची पद्धत वापरणाऱ्या प्रत्येकाकडे उच्च दर्जाचा पंप नसेल. A आणि B एकाच सोल्युशनमध्ये मिसळा आणि ते 100% इनलाइन चालवा.

उदाहरणार्थ, 50 मिली पाण्यात मिसळून 950 मिली सेंद्रिय प्रारंभिक मिश्रण तयार केले जाऊ शकते. याचा फायदा असा आहे की ते HPLCs मधील परिवर्तनशीलता कमी करू शकते आणि सिस्टममध्ये बुडबुडे आणि पर्जन्यवृष्टीची शक्यता कमी करू शकते. हे लक्षात घेण्यासारखे आहे की पंप मिश्रणाचे गुणोत्तर 95:5 आहे, याचा अर्थ असा नाही की बाटलीमध्ये पूर्व-मिश्रित ठेवण्याची वेळ देखील 95:5 आहे.

06. बफर बदलण्यासाठी योग्य सुधारित आम्ल (बेस) न वापरणे

तुम्ही वापरत असलेले बफर मीठ बनवणारे आम्ल किंवा बेस वापरा. उदाहरणार्थ, सोडियम फॉस्फेट बफर फक्त फॉस्फोरिक ऍसिड किंवा सोडियम हायड्रॉक्साईडसह तयार केले पाहिजे.

07. पध्दतीमध्ये बफरबद्दल सर्व माहिती न सांगणे, जसे की 5 ग्रॅम जोडणेसोडियम फॉस्फेट ते 1000 मिली पाणी.

बफरचा प्रकार पीएच श्रेणी निर्धारित करतो जी बफर केली जाऊ शकते. आवश्यक एकाग्रता बफर शक्ती निर्धारित करते. 5 ग्रॅम किंवा निर्जल सोडियम फॉस्फेट आणि 5 ग्रॅम मोनोसोडियम फॉस्फेट मोनोहायड्रेटमध्ये भिन्न बफर ताकद असते.

08. तपासण्यापूर्वी सेंद्रिय सॉल्व्हेंट्स जोडणे

जर मागील पद्धतीत बेसलाइन B साठी बफर सोल्यूशन वापरले असेल आणि तुमची पद्धत बेसलाइन B साठी सेंद्रिय द्रावण वापरत असेल, तर तुम्ही पंप टयूबिंग आणि पंप हेडमध्ये बफर सेटल करू शकता.

09. बाटली उचला आणि शेवटचा थेंब रिकामा करा

संपूर्ण धाव पूर्ण करण्यासाठी तुमच्याकडे पुरेसा मोबाइल फेज नसण्याची आणि तुमचा नमुना धुम्रपान करेल अशी चांगली शक्यता आहे. पंप प्रणाली आणि स्तंभ जळण्याच्या शक्यतेशिवाय, मोबाइल फेज पूर्णपणे बाष्पीभवन होईल आणि बाटलीच्या शीर्षस्थानी मोबाइल फेज बदलेल.

10. अल्ट्रासोनिक डिगॅसिंग मोबाईल फेज वापरा

सर्व बफर क्षार विरघळले आहेत याची खात्री करणे हा सर्वात महत्वाचा मुद्दा आहे, परंतु डेगासचा हा सर्वात वाईट मार्ग आहे आणि मोबाइल फेज त्वरीत गरम करेल, ज्यामुळे सेंद्रिय घटक बाष्पीभवन होतील. नंतर अनावश्यक त्रास वाचवण्यासाठी, तुमचा मोबाइल फेज व्हॅक्यूम फिल्टर करण्यासाठी पाच मिनिटे घ्या.